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CRISPR-Cas12a(Cpf1)

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Cas12a(Cpf1) crRNA

Alt-R CRISPR-Cas12a (Cpf1) 体系为CRISPR-Cas9 体系不能编辑的区域提供新的CRISPR 目标位点。Alt-R CRISPR-Cas12a 体系可以产生5’ 突出端的双链断裂,切割后可以通过非同源末端连接(NHEJ) 或同源重组(HDR) 修复DNA,产生序列变异。

产品标题

CRISPR-Cas12a(Cpf1) crRNA

产品简介

Alt-R CRISPR-Cas12a (Cpf1) 体系为CRISPR-Cas9 体系不能编辑的区域提供新的CRISPR 目标位点。Alt-R CRISPR-Cas12a 体系可以产生5’ 突出端的双链断裂,切割后可以通过非同源末端连接(NHEJ) 或同源重组(HDR) 修复DNA,产生序列变异。

  • 使在生物体内编辑富含 AT 碱基区域的基因组成为可能。
  • Cas9 系统相比,Cas12a系统允许编辑更多基因组区域。
  • 只需要简单地结合 crRNA Cas12a 蛋白,无需 tracrRNA。
  • 可通过电转染将 RNP 有效的传递到细胞内。

1  Alt-R CRISPR-Cas12a 体系使用简单。实验仅需两步:第一步,形成RNP 复合体;第二步,将RNP 通过电转等方法转染进入细胞系

产品详情


                                        图2 Alt-R CRISPR-Cas12a系统组成

Alt-R Cas12a crRNA与Cas12a核酸内切酶形成复合物指引靶向切割。 切割位点由crRNAprotospacer元件(绿色粗框)决定。 crRNA protospacer元件识别TTTV PAM位点的相对链上的21个核苷酸。 PAM必须上游紧邻protospacer元件才可以进行切割。

 V = A,CG

优化的CRISPR-Cas12a crRNA长度提升基因编辑表现

 针对HPRT基因设计不同长度的crRNA用Lipofectamine RNAiMAX™ 试剂 (Thermo Fisher)将crRNA转染至稳定表达Acidaminococcus sp.Cas12aHEK-293-Cas12a细胞系中。分离基因组DNA,通过目标位点的PCR扩增,随后用T7EI核酸内切酶(Alt-R Genome Editing Detection Kit)切割,并使用片段分析仪Fragment Analyzer(Advanced Analytical)进行分析。

3 包含21mer Protospacer元件的crRNA表现出良好的基因编辑中靶率。针对HPRT 基因设计不同长度的crRNA Lipofectamine® RNAiMAX 试剂(Thermo Fisher) crRNA 转染至稳定表达Acidaminococcus sp. Cas12a HEK-293-Cas12a 细胞系中。分离基因组DNA,通过目标位点的PCR 扩增,随后用T7EI 核酸内切酶(Alt-R Genome Editing Detection Kit)切割,并使用片段分析仪Fragment AnalyzerAdvanced Analytical)进行分析。

订购信息

客户定制crRNA靶向结合长度为21-24 basesTTTV

纳昂达货号

产品信息

长度

备注

205013

Alt-R® CRISPR-Cpf1 crRNA, 2 nmol

20-24Bases

 

205014

Alt-R® CRISPR-Cpf1 crRNA, 10 nmol

20-24Bases

205015

Alt-R® CRISPR-Cpf1 crRNA, 2 nmol, Plate

20-24Bases

采取96孔板包装时,不足24条需要额外收费
采取384孔板包装时,不足96条需要额外收费

205016

Alt-R® CRISPR-Cpf1 crRNA, 10 nmol, Plate

20-24Bases

采取96孔板包装时,不足24条需要额外收费
采取384孔板包装时,不足96条需要额外收费

下载资料

操作指南

1.使用Alt-R CRISPR-Cas 9 基因编辑系统 和 Ultramer Oligo进行同源重组 (下载请点击)

2. Alt-R CRISPR-Cpf1-RNP 电转-Amaxa Nucleofector system (下载请点击)

3. Alt-R CRISPR-Cpf1-RNP 电转-Neon Transfection system (下载请点击)

安全数据说明(SDSs

HDR-Enhancer (下载请点击)

Alt-R CRISPR nucleases and nickases (下载请点击)



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